KEIKO OMORI， MASATO MITSUHASHI， IVAN TODOROV， JEFFREY RAWSON， KEH-DONG SHIANG， FOUAD KANDEEL， YOKO MULLEN， Duarte， CA， Irvine， CA
   发展一种通过较少数量的胰岛评估胰岛β细胞功能的方法可以节约出跟多的胰岛用于移植，进而可以增加1型糖尿病移植成功的机率。虽然葡萄糖诱导胰岛素合成的调节主要在翻译水平，但是转录水平的改变在调节翻译效率方面也起了重要作用。在本研究中我们建立了一种测量胰岛素基因表达水平和评估胰岛素生物合成能力的方法。胰岛从脑死亡的捐赠者分离后仔细挑选，然后分别在含3.3mM 和 17 mM葡萄糖的培液中培养16个小时。上述培养后的胰岛抽提mRNA纯化后与oligo(dT)杂交，加入相关引物采用RT-PCR的方法检测未成熟（剪切前）和成熟（剪切后）mRNA表达量。引物设计分别在胰岛素基因的外显子、内含子和跨外显子内含子区域进行。高糖培养条件下孵育16个小时的胰岛未成熟mRNA水平显著高于培养4个小时的胰岛，而成熟mRNA在两种条件下无明显差异。热损伤的胰岛未成熟mRNA水平出现下降。通过成熟mRNA校正后的未成熟mRNA刺激指数(SI_mRNA)与孵育16个小时后胰岛素释放刺激指数显著相关(r=0.66， p=0.02)。SI_mRNA也与胰岛β细胞的凋亡水平负相关(r=0.75，p=0.005)(n=12)。STZ诱导糖尿病NODscid小鼠进行胰岛移植21天的血糖可以通过孵育16个小时胰岛的未成熟mRNA合成和胰岛素释放的多元回归分析预测(p=0.005)。通过测量葡萄糖诱导的未成熟mRNA水平（经过成熟mRNA水平校正）能够评估分离得到的胰岛功能特征，从而进一步预测1型糖尿病患者实施胰岛移植后的胰岛功能。

   编译 李文毅  上海市内分泌代谢病研究所
   审校  钱镭    上海交通大学附属第一人民医院 内分泌科